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Ficha n.º12 – Regulação do ciclo celular de Vicia faba  pelo extrato alcoólico de Annona cherimola 

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Annona cherimola é uma espécie arbórea de pequeno porte pertencente à família Annonaceae. O fruto é conhecido por vários nomes, entre os quais chirimoia, anona, nona^, ou ainda coração-de-negro.

              

Figura 1- Annona cherimola

O provável efeito antineoplásico do extrato de Annona cherimola é controverso. Como a neoplasia[1] envolve uma alteração do ciclo celular do tecido afetado, uma abordagem para avaliar o efeito antineoplásico do extrato consiste em expor uma população de células com o ciclo celular  alterado a esse mesmo extrato.

 O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do extrato alcoólico da polpa do fruto de A. cherimola sobre o ciclo celular Vicia faba (vulgarmente denominada fava), exposto ao corante alimentar tartrazina 0,1%, 0,3% e 0,5 %.

Foi montado um dispositivo experimental com seis tratamentos. A população de células estudada foi de V. faba        (2n = 12), inicialmente submetida à tartrazina[2] para induzir a alteração do ciclo celular e, em seguida, exposta ao extrato do fruto do A. cherimola para avaliar a provável regulação do ciclo celular.

Material e métodos:

• Os frutos cherimola foram mantidos a uma temperatura de 23ºC, até atingirem um estado de maturação avançada. A partir da polpa do fruto maduro foi preparado o extrato alcoólico.

• As sementes de faba foram colocadas em algodão humedecido com água destilada para induzir a sua germinação. Ao fim de 4 dias, foram selecionadas 18 semente com as raízes mais desenvolvidas (aproximadamente 1 cm).

• De seguida foram montados seis dispositivos experimentais:

T1 – raízes de V. faba colocadas em água destilada.

T2 – raízes de V. faba colocadas em tartrazina 0,1%.

T3 – raízes de V. faba colocadas em extrato A. cherimola a 5%.

T4 – raízes de V. faba colocadas em tartrazina  0,1% e extrato A. cherimola a 5%.

T5 – raízes de V. faba colocadas em tartrazina 0,3% e extrato A. cherimola a 5%.

T6– raízes de V. faba colocadas em tartrazina 0,5% e extrato A. cherimola a 5%.

• Fizeram-se 3 repetições para cada tratamento  e cada tratamento teve a duração de 4 horas.

[1] Neoplasia – também denominada tumor, é uma forma de proliferação celular não controlada pelo organismo, com tendência para a autonomia e perpetuação.

[2] Tartrazina – também conhecida com E102 é usada vulgarmente como corante alimentar.

Resultados

O indicador de alteração e regulação celular foi o índice mitótico (IM) das células meristemáticas de V. faba. A fórmula para determinar o índice mitótico foi:

• NCM- número de células em mitose
• NTC – número total de células meristemáticas.

Foram observada uma média de 1500 células por tratamento, em luz microscópica de campo, 400 X e 1000 X. Os resultados encontram-se expressos nas figuras que se seguem:

Adaptado de: Regulation of the cell cycle (CC) of Vicia faba L by the alcoholic extract of Annona cherimola Mill “cherimoya” Raúl A. Beltrán Orbegoso*; Paola M. Beltrán Casana Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional de Trujillo (UNT), Av. Juan Pablo II s/n. Ciudad Universitaria. Peru.

1. Explique de que modo a utilização do extrato de anona  (A. cherimola) poderá ser usado para evitar a proliferação de  células neoplásicas.

2. No estudo apresentado, a variável independente é _______.

(A) o número de células V. faba em interfase.

(B) o índice mitótico de V. faba.

(C) a aplicação do extrato de A. cherimola.

(D) a concentração do extrato de A. cherimola.

 

3. De acordo com os resultados, em Vicia fava, a aplicação de tartrazina ______ o índice mitótico das células de V. faba ­­­, aumentando o número de células _________.

(A)  diminui  …………. que se encontram  em fase de  replicação do DNA.

(B) diminui ……… cujos cromossomas se encontram em fase inicial de espiralização.

(C)  aumenta …………. cujos cromossomas se encontram em fase inicial de espiralização.

(D) aumenta …………. que se encontram  em fase de  replicação do DNA.

4. De acordo com os resultados apresentados, a maioria das células em fase mitótica, no ___. 

(A) tratamento 2 (T2), tinha os cromossomas alinhados na zona equatorial.

(B) tratamento 1 (T1), encontrava-se em fase de replicação do DNA.

(C) tratamento 6 (T6), tinha cromossomas posicionados em polos opostos da célula.

(D) tratamento 5 (T5), tinha cromossomas formados por dois cromatídeos.

5. Os resultados do estudo sugerem que a aplicação do extrato A. cherimola, influência a atividade mitótica das células sujeitas a tratamento com tartrazina  ­­­______.

(A) aumentando o número de células em divisão nuclear e diminuindo o número de células  em fase de multiplicação de organitos.

(B) aumentando o número de células em divisão nuclear e aumentando o número de células  em fase de multiplicação de organitos.

(C) diminuindo o número de células em divisão nuclear e  diminuindo o número de células  em fase de multiplicação de organitos.

(D) diminuindo o número de células em divisão nuclear e aumentando o número de células  em fase de multiplicação de organitos.

 

6. Foram feitas as seguintes afirmações relativas aos resultados da experiência realizada. Selecione a  alternativa que as avalia corretamente.

I. A análise das figuras 4 e 5 permite concluir que ao contrário do que sucede em T1, em T2 quase todas as células se encontram na mesma fase mitótica.

II. O extrato alcoólico da polpa de A. cherimola é capaz de regular o ciclo celular das células de V.fava, alterado por tartrazina.

III. A concentração de tartrazina usada não influência o número de células que se encontra  em divisão.

(A) I e II são verdadeiras; III é falsa.

(B) I e III são verdadeiras; II é falsa.

(C) III é verdadeira; I e II são falsas.

(D) II e III são verdadeiras; I é falsa.

7. A progressão do ciclo celular é regulada por vários complexos proteicos. Estudos recentes mostram que a tartrazina inibe o complexo CdK1- ciclina, responsável pela formação do fuso acromático, assim, como consequência verifica-se uma redução do número de células em ______. A ciclina também inibe a atividade catalítica responsáveis pela segregação cromatídica, como consequência direta o número de células em _______ diminui.

(A) profase……….. anafase

(B) metafase………anafase

(C) telofase ……… profase.

(D) metafase ……… profase.

8. Após a ocorrência de um ciclo celular completo de uma célula meristemática de Vicia fava forma-se uma ________ celular e as células-filhas apresentam _____.

(A) tétrada ………………. combinações de genes diferentes entre si.

(B) díada ………………. o mesmo cariótipo.

(C) díada ………………. combinações de genes diferentes entre si.

(D) tétrada ………………. o mesmo cariótipo.

9. Na figura 4 , a célula assinalada com a letra A, encontra-se em _______, onde ______.

(A) Metafase …….. os cromossomas se dispõem na placa equatorial.

(B) Metafase ……  ocorre a formação do fuso acromático

(C) Anafase ……… ocorre a separação dos cromatídeos – irmãos.

(D)  Anafase ……… reaparece a membrana nuclear e o nucleólo.

10. No início da fase mitótica, as células de Vícia fava, apresentam_____. 

(A) 12 cromossomas e 12 cromatídeos.

(B) 12 cromossomas e 24 cromatídeos.

(C) 6 cromossomas e  12 cromatídeos.

(D) 6 cromossomas e  e 24 cromatídeos.

11. As células de Vicia fava e de Annona cherimola são resistentes à lise celular, porque possuem uma ______ celular constituída essencialmente, por ________.

(A) parede ……..  celulose.

(B) parede ……… amido.

(C) membrana ……..  celulose.

(D) membrana ……..  amido.

12. Durante a fase fotoquímica de produção de matéria orgânica pela células de Vicia fava, ocorre____.

(A)  fixação de CO₂

(B) fosforilação de ADP

(C) oxidação do NADP+

(D) redução de O₂

13. Ordene as frases identificadas pelas letras de A a E, de modo a reconstituir a sequência cronológica dos acontecimentos associados a um ciclo celular completo de Vicia  faba.

(A) Alinhamento dos cromossomas no plano equatorial.

(B) Formação de duas células por citocinese.

(C) Cisão do centrómero.

(D) Replicação semiconservativa do DNA.

(E) Formação do fuso-acromático.

 

14. Faça corresponder a cada uma das afirmações relativas ao ciclo celular de Vicia faba expresso na coluna A, cada uma das fases que lhe corresponde expressa na coluna B.

Coluna A	Coluna B
(A) Reaparecimento da membrana nuclear e descondensação dos cromossomas. (B) Condensação dos cromossomas e formação do fuso acromático. (C)  No final desta fase a célula passa a apresentar duas cópias de cada molécula de DNA.  (D)  Disposição de vesículas golgianas na região equatorial formando a placa celular. (E)  Cisão do centrómero e migração polar dos cromatídeos.	1.     G1 2.     S 3.     G2  4.     Profase  5.     Metafase 6.     Anafase  7.     Telofase 8.     Citocinese