Atividade laboratorial 1 – Crescimento de leveduras em anaerobiose


 

A fermentação é um dos processos metabólicos utilizados pelas leveduras   para obtenção de energia a partir de um substrato. A experiência seguinte poderá ser realizada com o objetivo de  conhecer o processo fermentativo.

 

 

 

 

 

Material e métodos:

 

Material:

  • 3 garrafas térmicas
  • leveduras
  • glucose
  • água destilada
  • água de cal
  • 3 gobelés
  • 2 provetas
  • 2 balões de Erlenmeyer
  • balança
  • vidro de relógio
  • espátulas
  • 3 termómetros
  • 3 tubos
  • 3 vareta
  • conta-gotas
  • lâminas e lamelas
  • microscópio ótico composto

 

Procedimento experimental:

 

1. Marcar 3 garrafas térmicas com os números romanos I, II e III.

2. Preparar 200 mL de suspensão de leveduras a 10% (m/V).

3. Encher as garrafas I e II até ¾ da sua capacidade com uma solução de glucose a 30% (m/V), e encher a garrafa III com igual volume de água destilada.

4. Adicionar às garrafas I e III 100 mL de suspensão de leveduras a 10% (m/V) e à garrafa II 100 mL de água.

5. Introduzir água de cal1 em 3 gobelés.

6. Montar um dispositivo experimental, semelhante ao representado no vídeo que se segue, para cada uma das garrafas, I, II e III, e registar a temperatura em cada garrafa.

7. Ao fim de 48 horas, deverá registar-se:

–a temperatura do conteúdo das garrafas;

–o aspeto da água de cal.

8. Destapar as garrafas, mexer o respetivo conteúdo com uma vareta e registar os odores libertados.

9. Retirar uma gota de cada uma das suspensões das garrafas I e III, observar estas gotas ao microscópio ótico composto, com ampliação 10 × 40, e registar o número de células de levedura em cada caso.

1Água de cal – solução de aspeto límpido, que turva na presença de CO2.

 

 

Questões pós-laboratoriais:

 

 

1. Explique a necessidade da experiência  decorrer em garrafas térmicas fechadas.

Resolução

  • →Tópico 1: referência a que as leveduras são seres anaeróbios facultativos, ou seja na presença de oxigénio recorrem à respiração aeróbia como via metabólica para a produção de energia e na ausência de oxigénio recorrem à fermentação.
  • →Tópico 2: referência a que o objetivo da experiência é estudar o processo fermentativo, logo deverá garantir-se a ausência de oxigénio, pelo que a experiência deverá recorrer em garrafa fechada.
  • →Tópico 3: referência a que na experiência pretende-se avaliar a variação da temperatura daí a necessidade de utilizar a garrafa térmica de modo a impedir a dissipação do calor para o exterior.

 

 

2. As leveduras são seres ______.

 

(A) eucariontes e unicelulares.

(B) eucariontes e pluricelulares.

(C) procariontes e unicelulares.

(D) procariontes e pluricelulares.

Resolução

  • Opção A

As leveduras são fungos unicelulares. Os fungos são  incluídos no Reino Fungi. Todos os seres do Reino Fungi são  eucariontes.

 

 

3. A glucose é _____ pertencente à categoria dos _____.

 

(A) aminoácido …. prótidos

(B) aminoácido ….. glícidos

(C) monossacarídeo …. prótidos

(D) monossacarídeo ….glícidos

Resolução

  • Opção D

A glucose é um monossacarídeo. Os monossacarídeos são os glícidos mais simples.

 

 

4. Durante o processo fermentativo ocorre a _________.

 

(A) oxidação completa da molécula de glicose em aerobiose.

(B) oxidação completa da molécula de glicose em anaerobiose.

(C) oxidação incompleta da molécula de glicose em aerobiose.

(D) oxidação incompleta da molécula de glicose em anaerobiose.

Resolução

  • Opção D

A fermentação consiste na oxidação incompleta da molécula de glicose na ausência de oxigénio (anaerobiose).

 

 

5. A ocorrência de reações de_______ durante o processo fermentativo conduz à turvação da água de cal no dispositivo ____.

 

(A) oxidação … I

(B) oxidação … III

(C) descarboxilação … I

(D) descarboxilação …. III

Resolução

  • Opção C

A água de cal turva na presença de CO2. Durante o processo de fermentação alcoólica ocorrem reações de descarboxilação que conduzem à libertação de CO2 responsável pela turvação da água de cal. Como no dispositivo I ocorre a fermentação alcoólica, o mesmo não acontecendo no dispositivo III, a água de cal deverá estar turva no gobelé associado à garrafa I e deverá estar límpida no gobelé associado à garrafa III.

 

 

6. O maior número de leveduras na garrafa ______ é uma consequência direta da maior disponibilidade de ____ fundamental para a multiplicação das leveduras.

 

(A) I …. etanol

(B) I …. energia

(C) III …. etanol

(D) III … energia

Resolução

  • Opção B

Durante o processo de fermentação alcoólica que decorre na garrafa III é produzida energia, fundamental ao processo de multiplicação das leveduras.

O etanol é apenas um subproduto da fermentação alcoólica.

 

 

7. Com o decorrer da experiência será de prever que a concentração de glucose na garrafa I, vá ______ .

 

(A) aumentar, por evaporação da água.

(B) aumentar, por  esta ser produzida durante o processo fermentativo.

(C) diminuir, por esta ser degradada durante o processo fermentativo

(D) diminuir, por condensa originando polissacarideos.

Resolução

  • Opção C

A glucose constitui o substrato da fermentação, assim durante o processo fermentativo a sua concentração vai diminuindo à medida que esta vai sendo degradada.

 

 

8. Uma das variáveis dependentes do estudo experimental descrito é _______.

 

(A) a espécie de levedura usada.

(B) a temperatura a que decorreu a experiência.

(C) o tipo de açúcar  usado.

(D) a quantidade de leveduras.

Resolução

  • Opção D

Nesta experiência é avaliado o crescimento das leveduras, a produção de CO2 e a variação da temperatura, assim o crescimento das leveduras constitui uma das variáveis dependentes em estudo.

 

 

9. A realização de experiências laboratoriais implica a existência de grupos controlo e experimentais. No caso da experiência realizada _____.

 

(A)  o dispositivos II e III correspondem aos grupos controlo e o dispositivo I ao grupo experimental.

(B) o dispositivos I e III correspondem aos grupo controlo e o dispositivo II ao grupo experimental.

(C) o dispositivos I e III correspondem aos grupos experimentais e o dispositivo II ao grupo controlo.

(D) o dispositivos I e II correspondem aos grupos experimentais e o dispositivo III ao grupo controlo.

Resolução

  • Opção A

O dispositivo I corresponde ao grupo experimental e os dispositivos II e III correspondem aos grupos controlo. A existência destes dois dispositivos permite concluir que a ocorrência da  fermentação alcoólica nesta atividade implica a  presença de glucose e leveduras.

 

 

10. O aumento da temperatura registada no dispositivo I pode ser explicada pelo facto da fermentação alcoólica corresponder a um processo ______.

 

(A) anabólico e endoenergético.

(B) anabólico e exoenergético.

(C) catabólico e endoenergético.

(D) catabólico e exoenergético.

Resolução

  • Opção D

Os processos de obtenção de energia correspondem a processos catabólicos e exoenergéticos.

 

 

11. O etanol é um molécula que apresenta _______. A  sua presença  indica a ocorrência de uma via metabólica de ______.

 

(A) baixa energia potencial ….. alto rendimento energético.

(B) alta energia potencial …… alto rendimento energético .

(C) baixa energia potencial ….. baixo rendimento energético.

(D) alta energia potencial …… baixo rendimento energético.

Resolução

  • Opção D

Na fermentação alcoólica apenas se produzem 2ATP (baixo rendimento energético), uma vez que durante a fermentação alcoólica a oxidação da molécula de glicose é incompleta, logo a energia contida na molécula de glicose não é extraída na sua totalidade ficando acumulada no etanol. Logo o etanol é uma molécula de elevada energia potencial.

 

 

12. Ordene pela respetiva ordem cronológica os seguintes acontecimentos  que dizem respeito ao  processo de fermentação alcoólica.

 

A. Ativação do substrato energético.

B. Evaporação do etanol.

C. Oxidação de trioses.

D. Hidrólise do ATP

E. Redução do piruvato.

Resolução

  • D – A – C- E – B

 

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