Voltar a: Biologia – 10ºAno
Atividade laboratorial 1 – Características da imagem em microscopia ótica
Fundamentação teórica
A invenção do microscópio mudou completamente a maneira do homem ver o mundo. A microscopia possibilitou a observação e exploração de diversas áreas até então desconhecidas, revolucionando o conhecimento científico. O que até então era invisível a olho nu passou a ser analisado através das lentes do microscópio.
A descoberta da célula como unidade funcional da vida só foi possível após a invenção do microscópio por Van Leeuwenhoek. Robert Hooke descreveu, pouco tempo depois, as células da cortiça, o que permitiu o reconhecimento de que todos os tecidos vivos eram formados por células.
O microscópio é constituído por duas componentes: a ótica e a mecânica.
Componente ótica
Figura 1- Componente ótica do microscópio ótico.
Oculares: É um sistema de lentes que pode ser monocular, binocular e trinocular que, geralmente, possui um aumento de até 10 vezes.
Objetivas: Ampliam a imagem do objeto observado. A maioria dos microscópios apresenta quatro objetivas: 4X; 10X; 40X e 100X.
Condensador: Concentra os feixes de luz que incidem sobre a amostra a ser analisada.
Diafragma: Controla a quantidade de luz que entra no condensador.
Fonte luminosa: É a fonte que emite luz, passando pelo condensador, pelo diafragma, pela lâmina e deverá atravessar a amostra.
Componente mecânica
Figura 2- Componente mecânica do microscópio ótico.
Tubo ou canhão: É uma parte utilizada como suporte para as oculares.
Revólver: É um disco rotativo onde são acopladas as lentes objetivas. Através dele é possível girar e selecionar qual a lente mais adequada para a visualização da amostra.
Platina: Base onde é possível apoiar a lâmina para visualização da amostra.
Parafuso macrométrico: Parte do microscópio que permite focar a amostra ao movimentar rapidamente a platina.
Parafuso micrométrico: Parte do microscópio que permite focar a amostra ao movimentar lentamente a platina.
Coluna: Suporte para as demais peças do microscópio.
Base: Instrumento de apoio para todo o microscópio.
Protocolo experimental
Material:
- Um pedaço de folha de um jornal ou a letra F escrita em quadrados de papel
- Tesoura
- Lâmina para microscopia
- Microscópio
- Lamela
- Agulha
- Régua
- Conta-gotas
- Papel absorvente
- Água
Figura 3- Montagem de uma preparação temporária ( fonte: https://www.microscopeworld.com/)
Procedimento
- Recortar a palavra F ou escrevê-la em quadrado de papel com 1 cm2
- Colocar uma gota de água sobre a lâmina.
- Colocar a letra na lâmina.
- Retirar o excesso de água com papel absorvente.
- Observar com a objetiva de 4X, de 10X e de 40 X e esquematizar.
Resultados
Figura 4 – Letra F observada ao microscópio.
Figura 4 – Letra F observada ao microscópio utilizando objetivas com diferente poder de resolução (4X; 10X; 40X).
Questões pós-laboratoriais
1. O micrótomo é um instrumento essencial utilizado em laboratórios de histologia e patologia para realizar cortes finos de tecidos. Os micrótomos modernos permitem cortes extremamente finos e transparentes de uma espessura de 0,1 até 100 µm, sendo 1 micrómetro (μm) equivalente à milésima parte de 1 milímetro (mm).
Explique a importância da utilização do micrótomo na observação de tecidos.
⇒ Em microscopia ótica a luz que chega aos nossos olhos para formar a imagem atravessa primeiro o objeto em estudo.
⇒O material biológico a ser observado não pode ser opaco, mas deve ser fino o suficiente para permitir a passagem da luz e, conseqüentemente, ser mais bem visualizado ao microscópio.
⇒ O uso do micrótomo permite a obtenção de cortes finos que possam ser atravessados pela luz.
2. Na utilização do m.o.c. , deverá iniciar a observação com a objetiva de _______ que permite observar ______.
(A) menor poder de ampliação …. uma área maior
(B) menor poder de ampliação ….. com maior pormenor
(C) maior poder de ampliação …….uma área maior
(D) maior poder de ampliação ……. com maior pormenor
- Opção A
⇒A primeira observação deverá ser feita com a objetiva de menor ampliação, que permite observar uma área maior mas com menor pormenor. Utilizando esta objetiva deverá proceder-se à focagem, para assim selecionar a área a observar posteriormente, com as objetivas de maior ampliação. A uitilização das objetivas de maior ampliação permite observar uma menor área mas com maior pormenor.
3. O óleo de imersão deverá ser usado _______
(A) com a objetiva de menor poder de ampliação, para que o índice de refração seja igual para a lâmina de vidro e o óleo.
(B) com a objetiva de menor poder de ampliação, para que o índice de refração seja diferente para a lâmina de vidro e o óleo.
(C) com a objetiva de maior poder de ampliação, para que o índice de refração seja igual para a lâmina de vidro e o óleo.
(D) independentemente do poder de ampliação da objetiva, para que o índice de refração seja diferente para a lâmina de vidro e o óleo.
- Opção C
⇒ Na objetiva de 100x, que é chamada de objetiva de imersão, deve ser utilizado o óleo de imersão para que o índice de refração seja igual para a lâmina de vidro e o óleo. Isto faz com que os raios luminosos não se dispersem ao atravessarem o conjunto lâmina-óleo, permitindo a entrada de um grande cone de luz na objetiva. E assim permite uma melhor resolução.
4. A microfotografia da Figura 2 A foi obtida utilizando a objetiva 4x. De acordo com os procedimentos habituais em microscopia _______.
(A) a objetiva 10x permite observar com menor pormenor a letra do que a objetiva utilizada.
(B) a maior abertura do diafragma permite observar um maior área.
(C) a microfotografia obtida corresponde a uma ampliação total de 40X.
(D) a microfotografia obtida corresponde a uma ampliação total de 4x.
- Opção C
⇒ Ao utilizar a objetiva de 4x, e uma ocular de 10X, a ampliação do objeto observado corresponde a uma ampliação total de 40X.
5. Sobre a imagem em microscopia, foram feitas as seguintes afirmações. Selecione a alternativa que as avalia corretamente.
1.A ampliação total da imagem dada por uma combinação de lentes é igual ao aumento da objetiva multiplicado pelo aumento da ocular.
2. Ao aumentar a ampliação, diminui o detalhe.
3. A imagem dada pelo microscópio é duplamente invertida.
(A) 1 e 2 são verdadeiras; 3 é falsa.
(B) 2 e 3 são verdadeiras; 1 é falsa.
(C) 1 e 3 são verdadeiras; 2 é falsa.
(D) 1 é verdadeira; 2 e 3 são falsas.
- Opção C
⇒ 1. V A ampliação total obtida corresponde ao produto da multiplicação da ampliação da ocular pela ampliação da objetiva.
⇒ 2. F Ao aumentar a ampliação, aumenta o detalhe.
⇒ 1. V A imagem dada pelo microscópio é duplamente invertida, ou seja, é simétrica em relação à imagem real.
6. Na observação de uma preparação com o MOC utilizado nesta atividade laboratorial, verifica-se __________.
(A) que, quanto maior for a ampliação utilizada, maior será o campo de observação.
(B) que a imagem é simétrica e invertida em relação à imagem real.
(C) a imagem obtida é igual à imagem real.
(D) que a luz fornecida pela fonte luminosa é dispersada pelo condensador.
- Opção B
⇒A imagem em microscopia é simétrica e invertida em relação à imagem real.
7. Relativamente ao processo de focagem foram feitas as seguintes afirmações. Selecione a alternativa que as avalia corretamente.
1. Para efetuar a focagem o diafragma deve estar completamente fechado.
2 A primeira focagem deverá ser efetuada com o parafuso macrométrico, que permite movimentos lentos da platina.
3. O parafuso micrométrico, permite corrigir a focagem até obter uma imagem nítida.
(A) 1 e 2 são verdadeiras; 3 é falsa.
(B) 2 e 3 são verdadeiras; 1 é falsa.
(C) 1 e 3 são verdadeiras; 2 é falsa.
(D) 1 é verdadeira; 2 e 3 são falsas.
- Opção D
⇒1. F – Ao iniciar a observação ao microscópio o diafragma deverá estar aberto. No entanto, a abertura do diafragma poderá ser regulada ao longo da observação de forma a obter-se a melhor imagem.
⇒2. F – A primeira focagem deverá ser realizada com o parafuso macrométrico que permite movimentos rápidos da platina.
⇒3. V – O parafuso micrométrico, permite corrigir a focagem até obter uma imagem nítida.
8. Ordene as expressões identificadas pelas letras de A a E, de modo a reconstituir a sequência de etapas, desde a colocação de uma preparação na platina até à sua observação, na ampliação 10×40.
A. Observar a letra F na objetiva de 4X.
B. Aproximar a platina o mais possível da objetiva.
C. Focar a imagem com o parafuso macrométrico.
D. Rodar o revólver para a objetiva de 40× e ajustar a focagem.
E. Ajustar a focagem com o parafuso micrométrico numa ampliação de 100×.
⇒ A – B – C- E- D
